培养基怎么灭菌（除菌）？湿热、煮沸、过滤

实验室里培养基灭菌，很多人跟着 SOP 照做。121℃、15分钟，按下按钮就走人。

但灭菌不是越久越保险。121℃只是个起点，真要合规得靠验证。灭过了头，糖会焦化，指示剂会褪色，目标菌直接不长。而且锅里的冷空气必须排尽，装液量别超过容器的三分之二，灭完还得赶紧冷却、测 pH。

最容易踩坑的是煮沸。很多人以为煮开了就无菌，其实它杀不死细菌芽孢。严格讲这只能叫“煮沸杀菌”。像紫红胆盐葡萄糖琼脂这类热敏培养基，药典明令禁止进高压锅，只能靠煮沸溶解。

还有一类成分绝对不能进灭菌锅。抗生素、血清、维生素这些，必须等基础培养基灭好菌、晾到 50℃左右，再把过滤除菌后的成分加进去。记住，除菌一律用 0.22 微米滤膜，一次性滤器用完就扔，千万别重复用。

灭菌不是按完按钮就结束。每批都得留底，证明这批培养基既没长杂菌，又能养活目标菌。